Стандарт предприятия плазма для фракционирования. Научное обоснование оптимизации обеспечения учреждений здравоохранения российской федерации лечебными препаратами донорской плазмы
52 I.";;:,1 IpemeDuum
МЕНЕДЖМЕНТ
Е.Б. ЖИБУРТ, д.м.н., профессор, С.Р. МАДЗАЕВ, к.м.н.
ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России
По поводу новой фармакопейной статьи
«ПЛАЗМА ЧЕЛОВЕКА ДЛЯ ФРАКЦИОНИРОВАНИЯ»
Плазма крови человека содержит много белков, которые выделяют, очищают и включают в лекарственные препараты, имеющие огромное клиническое значение. Полученные из плазмы продукты спасают жизни, но количество плазмы для фракционирования ограничено количеством доноров. С 1 января 2016 г. вступила в действие фармакопейная статья «Плазма человека для фракционирования» . Представляет интерес оценка соответствия этой фармакопейной статьи (ФС) практике российской службы крови, а также сравнение ее с аналогичной монографией Европейской Фармакопеи .
Критический анализ новой фармакопейной статьи позволил выявить ряд ее недостатков. В отечественной ФС много балластных слов. Например, в разделе «Доноры» объемную фразу «Для производства плазмы крови человека может быть использована плазма здоровых доноров, отобранных по результатам медицинского обследования, изучения медицинского анамнеза и лабораторного исследования крови в соответствии с требованиями действующих нормативных правовых актов» можно безболезненно сократить до предложения: «Плазму крови человека получают от доноров, отобранных в соответствии с требованиями действующих нормативных правовых актов». Используемый в ФС термин «единица плазмы» - это неудачный перевод англоязычного термина «plasma unit». По-русски привычнее говорить «доза плазмы». Серьезная ошибка - ограничивать перечень методов скрининга серологических маркеров инфекций до одного иммуноферментного анализа. В России для этой цели регламентировано использование еще 3 иммунологических методов: иммунохемилюминес-центного анализа, пассивной гема-гглютинации и преципитации . Если подходить формально, то даже лаборатория «Росплазмы» не сможет обследовать доноров на оборудовании, закупленном в рамках национального проекта «Здоровье» .
Ключевые слова:
плазма, донор, фракционирование, обследование, инфекции
Keywords: plasma, donor, fractionation, examination, infection
The article evaluates the conformity between the new pharmacopoeial article «Human plasma for fractionation» and functions of the Russian Blood Service; there is a comparison with the corresponding monograph of the European Pharmacopoeia. The authors conclude that the following changes should be made in the new pharmacopoeial article: cancel: restrictions on methods of screening for infection markers, requirement for compulsory plasma quarantine, species-specific tests, test for specific activity in the production of normal immunoglobulin. E.B. ZHIBURT, MD, Prof., S.R. MADZAEV, MD, National Medical and Surgical Centre named after N.I. Pirogov, MH RF. ON THE NEW PHARMACOPOEIAN ARTICLE «HUMAN PLASMA FOR FRACTIONATION.»
обследования по истечении установленного срока карантинного хранения свежезамороженной плазмы свежезамороженная плазма может быть использована для производства препаратов крови или переливания реципиенту при условии инактивации патогенных биологических агентов» .
Непонятно требование отвода доноров со «специфическими и неспецифическими маркерами инфекции». Что такое «неспецифический маркер инфекции»? К специфическим маркерам инфекции относят защитные антитела, например анти-HBs. Их наличие - благо и условие получения иммуноглобулина. Зачем же уничтожать такую плазму? Принудительная карантиниза-ция - зло, поскольку она снижает нашу конкурентоспособность. Загадочна фраза: «Перед формированием производственного пула (загрузки) индивидуальные единицы плазмы объединяют для проведения испытаний по показателям». Еще одна ошибка - ограничивать технологии амплификации нуклеиновых кислот патогенов лишь одним методом полимеразной цепной реакции. Например, метод амплификации, опосредованной транскрипцией, применяющийся в России, в ряде испытаний показал более высокую чувствительность .
Вызывает недоумение тот факт, что в двух соседних предложениях цвет плазмы различен: желтый и зеленый. Удивительна предписанная оценка подлинности плазмы для фракционирования с использованием сывороток против сывороточных белков крови человека, крупного рогатого скота, лошади и свиньи. В Европейской Фармакопее такое требование отсутствует.
ПО ПОВОДУ ФАРМАКОПЕЙНОЙ СТАТЬИ «ПЛАЗМА ЧЕЛОВЕКА ДЛЯ ФРАКЦИОНИРОВАНИЯ»
Российские организации службы крови работают только с людьми, обеспечивают прослеживаемость каждой дозы. Своеобразной фантазией нужно обладать, чтобы представить крупный рогатый скот, лошадей и свиней в донорских залах наших станций переливания крови.
В разделе «Специфическая активность» представляется абсолютно излишним требование для производства препаратов иммуноглобулина человека нормального указывать количественное содержание антибактериальных антител (минимум против одного возбудителя) и противовирусных антител (минимум против одного возбудителя). Это нерациональные (бессмысленные) обременительные исследования (зачем смотреть антитела к каким-то (любым!) бактерии и вирусу?). Этот абзац нужно вовсе удалить. На наш взгляд, следует удалить и раздел «Вирусная безопасность» (забавно включение сифилиса в этот раздел), косноязычно дублирующий требования, перечисленные в разделе «Индивидуальная единица плазмы». Однозначно нужно сформулировать, что объектом исследования является кровь донора, отобранная в процессе дона-ции, а не контейнер с заготовленной плазмой.
Требования к маркировке плазмы нужно привести в соответствие национальному стандарту .
Надпись «Антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, к вирусу гепатита С и поверхностный антиген вируса гепатита В отсутствуют», помещаемая как на плазме, так и на готовых препаратах крови, - наш позор. Получается, вирусы вполне могут быть, а сделали только банальное, совершенно несуразное (нет антигена р24, нет NAT) обследование . В отличие от Европейской Фармакопеи в отечественной фармакопейной статье не определены уровни чувствительности молекулярно-биологических методов, не предполагается определение естественных ингибиторов нуклеиновых кислот.
Анализ новой фармакопейной статьи показал, что она нуждается в серьезном редактировании.
А именно: необходимо внести следующие изменения в новую фармакопейную статью - отменить ограничения методов скрининга маркеров инфекций, требование обязательной ка-рантинизации плазмы, видоспецифи-ческое тестирование, исследование специфической активности при производстве нормального иммуноглобулина. ^
ИСТОЧНИКИ
1. Приказ Минздрава России №768 от 21 ноября 2014 г. «Об утверждении общих фармакопейных статей и фармакопейных статей».
2. Human plasma for fractionation. 07/2008:0853. European Pharmacopoeia 7.0: 2181-2182 (http://180.l68.103.34:7947/zl/ EP7/0853E.PDF по состоянию на 02.11.2015).
3. Постановление Правительства РФ от 31 декабря 2010 г. №1230 «Об утверждении правил и методов исследований и правил отбора образцов донорской крови, необходимых для применения и исполнения технического регламента о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в транс-фузионно-инфузионной терапии».
4. Лаборатория серологического скрининга донорской плазмы, г. Киров/ http://www.ros-plasma.ru/galery/index.php?id=66 (по состоянию на 26.10.2015).
5. Постановление Правительства РФ от 26 января 2010 г. №29 «Об утверждении технического регламента о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии».
6. Национальный стандарт Российской Федерации ГОСТ Р 52938-2008 «Кровь донорская и ее компоненты. Контейнеры с консервированной кровью или ее компонентами. Маркировка».
7. Жибурт Е.Б. Обращение компонентов и препаратов крови. Ремедиум, 2004, 11: 56-57.
8. Жибурт Е.Б. Повышение вирусной безопасности препаратов крови. Вопр. вирусологии, 2004, 49(4): 46-48.
кроме того...
Внедрением электронной маркировки лекарств в России займется ФНС
Первый вице-премьер РФ Игорь Шувалов поручил Федеральной налоговой службе (ФНС) внедрить систему электронной маркировки ^Ш-мет-ки) лекарственных препаратов, а также изделий легкой промышленности и продуктов питания для их идентификации и борьбы с контра-фактом. Он подчеркнул, что речь идет не о тестовом режиме, а о максимально широком развертывании новой системы маркировки в отношении наиболее чувствительных в сложившихся условиях категорий товаров. Проект внедрения государственной системы мониторинга оборота ЛС, предусматривающий индивидуальную маркировку упаковок препаратов, был разработан Минздравом летом прошлого года. Подобная мера позволит упростить таможенные процедуры при пересечении партиями ЛС границ РФ, а также затруднит вброс контрафактной и фальсифицированной продукции на внутренний рынок.
Минздрав готовится разрешить продажу ЛС в супермаркетах
Министерство здравоохранения приступило к разработке законопроекта о реализации в розничных продовольственных торговых сетях ограниченного перечня лекарственных препаратов. Уведомление о начале работы над документом размещено на едином портале проектов нормативных правовых актов. Министерство предлагает внести ряд изменений в федеральные законы «Об обращении лекарственных средств» №61-ФЗ и «О лицензировании отдельных видов деятельности» №99-ФЗ. В паспорте законопроекта указывается, что его разработка была начата по поручению первого вице-премьера Игоря Шувалова. Вопрос о возможности реализации отдельных категорий безрецептурных ЛС в продовольственных магазинах неоднократно обсуждался в правительстве на протяжении последних нескольких лет. Министерство здравоохранения, а также представители объединений аптечных сетей выступали против этой инициативы.
-- [ Страница 4 ] --
Плазма человека, предназначенная для фракционирования, распределяется на 3 категории. Плазма 1 и 2 категории используется для изготовления фактора VIII и фактора IX, плазма 3 категории – для альбумина и иммуноглобулинов (табл. 3). Указанные категории плазмы различаются по особенностям получения плазмы и срокам замораживания после сдачи крови донорами, по применяемой температуре замораживания и хранения, по срокам ее хранения и годности, по времени доставки плазмы на переработку. К плазме 3-ей категории может относится не только плазма, отделенная от цельной крови, но плазма, при хранении и транспортировании которой отмечалось нарушение температурного режима. Поэтому она называется восстановленная (recovered) плазма и пригодна только для производства стабильных белковых компонентов – иммуноглобулинов и альбумина.
Качество, стандартность и безопасность плазмы для производства препаратов определяется фармакопейным стандартом. Большинство европейских стран имеет национальные фармакопеи. Европейская Фармакопея предназначена для создания единого фармакопейного пространства для стран континента, стремящихся к взаимной интеграции экономики, здравоохранения, промышленности в рамках Европейского Союза. В 2002 г. впервые была опубликована отечественная Фармакопейная Статья 42-0091-02 «Плазма для фракционирования», являющаяся национальным стандартом, обязательным для исполнения всеми российскими производителями препаратов плазмы. Сопоставление соответствующей Фармакопейной Статьи (ФС 42-0091-02) «Плазма для фракционирования» с Европейской Фармакопеей выявило, что в рассматриваемый документ целесообразно ввести коррективы.
Во-первых, необоснованно ограничены способы получения плазмы. Необходимо учитывать, что в Службе крови значительная часть плазмы (около 10%) выделяется после спонтанного оседания клеток. Кроме того, весьма существенны объёмы плазмы, остающейся после выделения криопреципитата. Принципиально важно выполнять такое требование, как немедленное замораживание плазмы после отделения от цельной крови, полученной плазмаферезом, вслед за отделением криоосадка. Режим замораживания и хранения плазмы следует указывать в отдельных разделах ФС, поскольку они зависят от предназначения плазмы – получения стабильных или лабильных фракций плазмы.
Важным условием является указание на то, что плазма должна поступать на фракционирование только в индивидуальном первичном стеклянном или пластиковом контейнере от одного донора, который должен быть проконтролирован на целостность и наличие этикетки. Идентификация каждого индивидуального контейнера с плазмой возможна только на основании этикетки и сопровождающего документа, надлежащим образом оформленными и подписанными лицом, юридически ответственным за паспортизацию плазмы. Данных, указанных на этикетке должно быть вполне достаточно, чтобы допустить плазму до производства или направить в лечебные учреждения.
Качество и стандартность собранной плазмы определяется проведением соответствующего набора исследований, однако предусмотренный ФС 42-0091-02 набор исследований, не целесообразно выполнять в полном объеме по отношению к каждой порции плазмы не только с технической точки зрения, но весьма не рационально с экономических позиций, так как требует необоснованных и существенных экономических вложений. Целый ряд исследований (тесты на прозрачность, цветность, рН, белок) могут быть проведены после объединения плазмы в загрузку (пул), тем более что тесты на вирусную безопасность должны проводиться только после объединения плазмы. Это приводит и к сокращению времени на исследования, поскольку при производстве препаратов плазмы высокого качества необходимо максимально сократить время от момента размораживания плазмы до начала технологического процесса.
Существующий в нашей стране срок хранения замороженной плазмы в течение 1 года, в 2 раза меньше, чем за рубежом, где срок хранения плазмы проводится в течение 2-х лет. Увеличение сроков хранения плазмы приводит к снижению стоимости производства препаратов плазмы.
В Европейском стандарте и других международных документах обозначено, что температура, при которой должно производиться хранение плазмы на 10 градусов ниже и составляет –20° С или ниже. Это влечёт за собой необходимость закупки более дорогостоящего оборудования, большего расходования электроэнергии. Поэтому повышение температуры хранения на 10 гр. также будет способствовать снижению затрат на заготовку и хранение свежезамороженной плазмы и сокращать стоимость производных продуктов плазмы.
Полученные данные и перечисленные рекомендации позволили разработать формы информационного письма, договора, спецификацию качества и документы-приложения, являющиеся частью договора, являющегося юридическим документом, определяющим ответственность поставщика за качество и безопасность плазмы и получателя за производство лечебных препаратов высокого качества.
Шестая глава «Обеспечение вирусной безопасности донорской плазмы» раскрыла роль проведения мероприятий, направленных на обеззараживания свежезамороженной плазмы. Продукты крови, перелитые пациентам, могут явиться источником заражения различными инфекциями, опасными для жизни и среди которых наиболее серьезными являются ВИЧ-инфекция, гепатит, вызванный вирусами гепатита В (HBV), гепатита С (HCV) и гепатита А.
С целью обеспечения вирусной безопасности донорской крови, её компонентов и препаратов были разработаны предложения, включающие комплекс мероприятий по обследованию доноров и крови включённые в Приказ Департамента здравоохранения г. Москвы № 513 от 29.11.2007 года «Об усилении мер, направленных на снижение риска развития посттрансфузионных инфекционных осложнений», являющийся обязательным к исполнению при работе с донорами на Станциях переливания крови.
Несмотря на то, что при сборе плазмы обязательным условием является обследование донора и собранного материала, полной уверенности в вирусной безопасности нет, поэтому обязательным условием дальнейшего использования собранной плазмы для фракционирования является выдерживание ее в течение не менее 3 мес. при температуре –30°С, что дает возможность изъять образцы плазмы при поступлении информации о заболевании доноров, находившихся в серонегативном периоде вирусной инфекции в момент донации.
Однако, вызванные для повторного обследования доноры не всегда приходят на повторное обследование. Полученные данные свидетельствуют, что ежегодно из-за неявки доноров на повторное обследование в среднем уничтожается 1605 литров плазмы, полученной в среднем от 3 500 – 3 600 доноров и находящейся на карантинизации. Учитывая, что это количество литров эквивалентно 12 485 дозам плазмы, то при условии, что 1 пациенту необходимо в среднем 3-5 доз плазмы, примерно 2 497 – 4 162 пациентов недополучают необходимые им в лечебных целях плазму и ее препараты.
Замораживание собранной плазмы и ее хранение требуют существенных затрат. Учитывая это обстоятельство, целесообразно и оправдано направление карантинизированной плазмы от доноров, не пришедших на повторное обследование, на инактивацию и удаление вирусов любым из разрешённых методов. В настоящее время методов инактивации вирусов известно достаточно много, но при этом разрешены для применения лишь некоторые из них. Для этих целей применяют тепловую обработку, обработку растворителем и детергентами, фотохимический метод. Наиболее приемлем для инактивации свежезамороженной плазмы S/D метод (сольвент-детергентная обработка плазмы). Имеется обширный практический опыт его применения для обработки больших количеств плазмы и достоверные данные об эффективности воздействия на ВИЧ-инфекцию и вирусы гепатитов В и С. Необходимость инактивации плазмы для трансфузий очевидна, поскольку свежезамороженная плазма продолжает занимать существенное место в лечебной практике.
Следует помнить, что инактивация вирусов – ответственная процедура, эффективность и безвредность которой для плазмы должна быть достаточно убедительно доказана. Эффективность удаления или инактивации вирусов имеет свои ограничения и, в любом случае, эти процедуры представляют собой компромисс между способностью уничтожать вирус и необходимостью избежать отрицательных последствий. Поэтому все эти методы дополняют процесс отбора и скрининга доноров, но не заменяют их.
Качество, стандартность и безопасность донорской плазмы могут достигаться безусловным исполнением регламентирующих документов при ее заготовке от донора и хранении.
В седьмой главе «Концепция реформирования отечественного производства препаратов плазмы» нашли свое отражение такие вопросы, как структурно-управленческие подходы к организации производства препаратов из свежезамороженной плазмы, оптимизация алгоритма заготовки свежезамороженной плазмы для фракционирования и экономическое обоснование современного производства препаратов плазмы.
Анализ опубликованных материалов свидетельствует, что производство препаратов донорской крови в нашей стране существенно отстает от мирового уровня, изготовление препаратов крови неэффективно в технологическом и экономическом отношении. Плазма крови доноров используется при переработке на 30-40% её лечебных возможностей ввиду отсутствия на предприятиях современных технологий и оборудования. С одной стороны с каждого литра переработанной плазмы из-за неполного ее использования и недополученной продукции теряется около 6 000 руб. в расчете по мировым ценам, а с другой стороны в стране ежегодно расходуются сотни миллионов долларов на импорт жизненно важных препаратов из крови, которых недостаточно для эффективного лечения.
В Российской Федерации в настоящее время имеются мелкие учреждения, мощностью переработки плазмы от 200 л. до 30 000 л. в год. Они находятся в составе Станций переливания крови или действуют как самостоятельные предприятия. Для их функционирования требуются значительные средства. В то же время достижение рентабельности таких производств невозможно, так как они не могут обеспечить технологический процесс стандартным оборудованием и оснащением, не располагают современной технологией, квалифицированными кадрами.
Во всем мире наблюдается концентрация производства препаратов, что позволяет достигать высокой экономической эффективности при минимальных технологических потерях и высокого качестве и вирусной безопасности продукции. Для научного обоснования инвестиций и организации предприятия соответствующей мощности необходимо было провести исследование, позволяющее доказать, что для самообеспечения страны плазмой и препаратами крови, достижения должного уровня качества, высокой эффективности производственной переработки плазмы, рентабельности изготовления и реализации лечебных средств необходимо создание крупных производственных предприятий, располагающих современной технологией фракционирования белков плазмы.
В диссертационном исследовании была использована "Методика коммерческой оценки инвестиционных проектов" ЮНИДО (UNIDO - United Nations Industrial Development Organization - специализированное учреждение ООН, целью которого является содействие промышленному разбито развивающихся стран). Данная методика стала первым в России систематическим изложением сложившихся в мировой практике понятий и инструментария оценки инвестиционных проектов, а также ключевых вопросов их применения в российской макроэкономической ситуации.
Для принятия решения о долгосрочном вложении (инвестиции) капитала необходимо располагать информацией, в той или иной степени подтверждающей два основополагающих предположения:
- вложенные средства должны быть полностью возмещены;
- прибыль, должна быть достаточно велика, чтобы компенсировать временный отказ от использования средств, а также риск, возникающий в силу неопределенности конечного результата.
Для принятия решения об инвестициях следует оценить план предполагаемого развития событий с точки зрения того, насколько содержание проекта и вероятные последствия его осуществления соответствуют ожидаемому результату.
Согласно методике была проведена оценка эффективности инвестиций по следующим критериям:
- инвестиционная привлекательность проекта,
- простые методы оценки эффективности,
- методы дисконтирования,
- чистая текущая стоимость проекта,
- внутренняя норма прибыли,
- учет фактора неопределенности и оценка риска
Проведенное технико-экономическое обоснование инвестиций позволило установить потребность здравоохранения Российской Федерации и Москва в препаратах и определить объём переработки плазмы для их получения. Установлено, что необходимо осуществить строительство 4-5 современных производственных предприятий с мощностью каждого не менее 200 000 литров фракционирования плазмы в год (табл. 4).
Полученные при разработке бизнес-плана результаты свидетельствуют, что затраты на создание начального оборотного капитала могут быть покрыты за счёт бюджетного финансирования на безвозвратной основе. В целом общая сумма государственной поддержки проекта составит 62% от общей стоимости проекта.
Таблица 4. Потребность в препаратах плазмы жителей Москвы, Московской области и Российской Федерации и ожидаемый выход готовой продукции при переработке 200 000 л. плазмы в год
| Потребность | Препараты свежезамороженной плазмы | ||||||
| Альбумин | Иммуно-глобулин | Фактор VIII | Фактор IX | ||||
| max | min | max | min | ||||
| кг | кг | млн. МЕ | млн. МЕ | ||||
| для г. Москвы, 10 млн. жителей | 2000 | 90 | 7,8 | 20 | 1,5 | 4,0 | |
| для Московской области 7 млн. жителей | 1400 | 63 | 5,5 | 14,0 | 1,9 | 2,8 | |
| для РФ без Москвы и Московской области, 126 млн. жителей | 25 200 | 1 134 | 252 | 1 000 | 34,6 | 50,0 | |
| Итого потребность для Российской Федерации | 28 600 | 1 287 | 265,3 | 1 034 | 38 | 56,8 | |
| Выход готового продукта при переработке 200 000 плазмы в год | 5 500 | 740 | 40 | 60 | |||
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
Вводится взамен ФС 42-0091-02
Настоящая фармакопейная статья распространяется на плазму для фракционирования, представляющую собой жидкую часть крови человека, остающуюся после отделения клеточных элементов крови, заготовленной с антикоагулянтом. Плазму для фракционирования получают из цельной крови человека методами центрифугирования, афереза и др. Плазма человека для фракционирования не должна содержать антибактериальных и противогрибковых средств.
Плазма человека для фракционирования используется в качестве субстанции для производства препаратов крови человека.
Доноры
Для производства плазмы крови человека может быть использована плазма здоровых доноров, отобранных по результатам медицинского обследования, изучения медицинского анамнеза и лабораторного исследования крови в соответствии с требованиями действующих нормативных правовых актов.
Зарегистрированные данные должны обеспечить идентификацию и прослеживаемость донора, каждой единицы плазмы, включённой в пул, а также связанных с ними образцов для лабораторных исследований.
Индивидуальная единица плазмы
Индивидуальная единица плазмы подвергается обязательному тестированию на отсутствие поверхностного антигена вируса гепатита В, на антитела к вирусу гепатита С, антигены ВИЧ p24, антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, возбудителю сифилиса. Образцы плазмы с отрицательными результатами тестов иммуноферментного анализа объединяют в минипулы и подвергают исследованию на наличие нуклеиновых кислот вирусов иммунодефицита человека, вирусов гепатитов В и С. При положительных результатах тестов плазму таких доноров бракуют и уничтожают.
Плазма, предназначенная для выделения лабильных белков (факторов свёртывания крови), должна быть заморожена до температуры минус 25°С и ниже не позднее 24ч после донации.
Плазма, предназначенная для выделения стабильных белков (альбумин, иммуноглобулины), полученная аферезом, должна быть заморожена до температуры минус 20°С и ниже не позднее 24ч после донации, а полученная иными способами до температуры минус 20°С и ниже не позднее 72ч после донации.
Для заготовки крови и ее компонентов используют полимерные контейнеры одноразового применения, соответствующие установленным требованиям. Упаковка должна быть герметичной для исключения контаминации микроорганизмами.
Карантинизация
Индивидуальные единицы плазмы подвергаются карантинизации в соответствии с действующими нормативными правовыми актами. При выявлении у донора гемотрансмиссивных инфекций в период карантинизации или наличии в крови донора по истечении срока карантинизации специфических и неспецифических маркеров гемотрансмиссивных инфекций, замороженная плазма, заготовленная от донора, должна быть изолирована, подвергнута дезинфекции и утилизирована с обязательной регистрацией этой процедуры.
Перед формированием производственного пула (загрузки) индивидуальные единицы плазмы объединяют для проведения испытаний по показателям. При производстве препаратов крови производственный пул (загрузку) плазмы обязательно тестируют на антиген ВИЧ p24 и антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, на антитела к вирусу гепатита C, поверхностный антиген вируса гепатита B, возбудитель сифилиса методами иммуноферментного анализа и на наличие нуклеиновых кислот вирусов иммунодефицита человека, вирусов гепатитов В и С методом полимеразной цепной реакции.
Результаты тестирования производственного пула по вирусной безопасности плазмы должны быть отрицательными.
Количество объединяемых индивидуальных единиц плазмы указывают в фармакопейной статье.
ИСПЫТАНИЯ
Описание
В замороженном состоянии – плотная затвердевшая масса желтоватого цвета. До замораживания и после размораживания (оттаивания) – прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость от светло-жёлтого до зеленоватого цвета. Не допускается наличие мути и хлопьев.
Примечание
Оттаивание индивидуальных единиц плазмы проводят при температуре (35-37)°С в течение 15 мин.
Подлинность (видоспецифичность)
Подлинность плазмы для фракционирования подтверждают наличием только сывороточных белков крови человека. Испытание проводят с использованием сывороток против сывороточных белков крови человека, крупного рогатого скота, лошади и свиньи методом иммуноэлектрофореза в геле в соответствии с или методом иммунодиффузии в геле в соответствии с .
Гемпигменты
Оптическая плотность испытуемого раствора должна быть не более 0,25. Определение проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях» в кюветах с толщиной слоя 10 мм при длине волны 403 нм относительно воды.
Примечание
Подготовка испытуемого образца. Испытуемый образец плазмы для фракционирования разводят 0,9 % раствором натрия хлорида в соотношении 1:4.
рН
От 6,5 до 7,5. Испытание проводят потенциометрическим методом в соответствии с , используя размороженную плазму.
Стерильность
Плазма должна быть стерильной. Испытание проводят в соответствии с . Метод определения указывают в фармакопейной статье.
Содержание белка
Не менее 5 %. Определение проводят подходящим методом в соответствии с .
Специфическая активность
В плазме человека для фракционирования, используемой для производства препаратов иммуноглобулина человека нормального, указывают количественное содержание антибактериальных антител (минимум против одного возбудителя) и противовирусных антител (минимум против одного возбудителя), например, содержание антиальфастафилолизина должно быть не менее 0,5 МЕ/мл; содержание противокоревых антител должно быть не менее 1:80. Определение проводят по методике(ам), указанной(ым) в нормативной документации (например, содержание противокоревых антител — в реакции пассивной гемагглютинации, содержание антиальфастафилолизина — в реакции нейтрализации гемолитических свойств стафилококкового альфа-токсина) с использованием стандартных образцов.
В плазме для фракционирования, используемой для производства препаратов иммуноглобулинов человека специфического и специального назначения, указывают количественное содержание специфических антител. Например, в плазме для фракционирования, используемой для производства иммуноглобулина человека антистафилококкового содержание антиальфастафилолизина должно быть не менее 3 МЕ/мл в плазме для фракционирования, используемой для производства иммуноглобулина человека против клещевого энцефалита содержание антител против вируса клещевого энцефалита должно быть не менее 1:10; в плазме человека для фракционирования, используемой для производства иммуноглобулина человека против гепатита В содержание антител к поверхностному антигену (HBsAg) вируса гепатита В должно быть не менее 5 МЕ/мл и др. Определение проводят по методике(ам), указанной(ым) в нормативной документации с использованием стандартных образцов.
В плазме для фракционирования, используемой для производства препаратов факторов свертывания крови, проводят определение активности фактора VIII в соответствии с . Активность фактора VIII должна быть не менее 0,7 МЕ/мл. Испытание проводят в объединенной пробе, содержащей не менее 10 индивидуальных единиц плазмы.
Вирусная безопасность
Поверхностный антиген (HBsAg ) и нуклеиновая кислота вируса гепатита В
Антитела к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ-1, ВИЧ-2) и нуклеиновая кислота вируса иммунодефицита человека
Должны отсутствовать. Определение проводят иммуноферментным методом и методом полимеразной цепной реакции с коммерческими тест-системами, разрешенными к применению в РФ, в соответствии с прилагаемыми к ним инструкциями.
Антитела к вирусу гепатита С и нуклеиновая кислота вируса гепатита С
Должны отсутствовать. Определение проводят иммуноферментным методом и методом полимеразной цепной реакции с коммерческими тест-системами, разрешенными к применению в РФ, в соответствии с прилагаемыми к ним инструкциями.
Антитела к возбудителю сифилиса
Плазма не должна содержать антител к возбудителю сифилиса. Определение проводят иммунологическим методом в реакции микропреципитации с коммерческими диагностическими наборами или иммуноферментным методом с коммерческими тест-системами, разрешенными к применению в РФ, в соответствии с прилагаемыми к ним инструкциями.
Упаковка и маркировка
Первичная упаковка (полимерные контейнеры одноразового применения) должна быть герметичной, обеспечивать сохранение заявленных свойств плазмы в течение регламентированного срока годности и разрешена к применению для упаковки лекарственных средств.
На этикетке упаковки указывают наименование и адрес организации донорства крови и ее компонентов, идентификационный номер донации, группу крови АВО и резус-фактор, дату донации, дату производства единицы плазмы (в случае, когда не совпадает с датой донации), дату окончания срока хранения, наименование и объем антикоагулянта и (или) добавочного раствора, наименование компонента крови, объем или массу крови либо компонентов крови, условия хранения, указание на дополнительную обработку (облучение, фильтрацию, инактивацию), надпись: «Антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, к вирусу гепатита С и поверхностный антиген вируса гепатита В отсутствуют».
Хранение
Хранят при температуре минус 30°С и ниже.
Транспортирование
Осуществляется при температуре минус 25 о С и ниже в специальных рефрижераторах (камерах, модулях), оборудованных датчиками и регистрирующими температуру устройствами.