Один из самых эффективных методов для диагностики половых инфекций — бактериологический посев. Периодичность взятия проб

По своей сути бак посев является микробиологическим лабораторным исследованием биологических материалов человека, осуществляемым их посевом на те или иные питательные среды при определенных температурных режимах. Бакпосев выявляет патогенные или условно-патогенные микроорганизмы и определяет их чувствительность к тем или иным медикаментозным препаратам.

Бактериологический посев различается в зависимости от используемых биологических материалов:

  • Бак посев крови (или полностью – бактериологический посев крови), показанный больным с лихорадкой и ознобом. Также бакпосев крови врачи назначают лицам с подозрением на эндокардит, иммуносупрессию или внутрисосудистую инфекцию. Применяется и бакпосев крови на стерильность.
  • Бак посев кала, позволяющий выявить дисбактериоз. Как правило, бакпосев кала назначается пациенту тогда, когда обычные анализы не способны выявить возбудителя той или иной инфекции. О том, как сдавать бак посев кала, должны рассказывать врач и лаборант.
  • Бак посев из носа и зева, показанный при ангинах, синуситах и ринитах. Бакпосев из зева позволяет выявить вирусы и бактерии, не выявляемые обычными анализами. А, например, бакпосев из носа в некоторых случаях помогает начать эффективное лечение без применения антибиотиков.
  • Бак посев из глаза, незаменимый при гнойно-воспалительных процессах глаз. Бак посев глаза, как и аналогичные посевы из других органов, позволяет выявить не проявляющую себя при других анализах инфекцию.
  • Бак посев мокроты, используемый при диагностике инфекций нижних дыхательных путей и туберкулеза легких. Бакпосев мокроты во многих случаях просто незаменим. Сбор мокроты на бак посев должен осуществляться под контролем лаборанта.
  • Бак посев выделений включает в себя посев всех биологических жидкостей, которые выделяются человеком в процессе его жизнедеятельности.
  • Бак посев желчи применяют при воспалительных заболеваниях печени и желчного пузыря, таких как холецистит, холангит, желчнокаменной болезни. Используют его для выявления микрофлоры и выбора наилучшей тактики лечения. Нормальный результат – отсутствие флоры. Если в результате бакпосева выделен любой микроорганизм, то он является положительным. Чаще всего высевают энтерококк. При обнаружении золотистого стафилококка можно сделать вывод о том, что есть печёночный или диафрагмальный абсцесс. Желчь собирают при зондировании или операции и помещают в контейнер 3-4 мл.
  • Бак посев из уретры у мужчин позволяет выявить заболевания, передающиеся половым путем. Бак посев из уретры незаменим в диагностике . Также, как у мужчин, бак посев из уретры у женщин применяется после того, как обычные анализы не выявили возбудителя присутствующего заболевания.
  • Бактериологический посев с кожи лица поможет выявить золотистый стафилококк и других представителей патогенной микрофлоры, а также грибки. Бак посев с кожи лица проводится со взятием кожного жира и эпителия.
  • Расшифровка бак посева мазка проводится в лаборатории. Бакпосев мазка содержит количество представителей нормальной, условно-патогенной и патогенной микрофлоры, а потому он весьма информативен. О том, что показывает бак посев мазка, пациент может узнать у своего лечащего врача.

Что такое бак посев

Ответ на вопрос о том, что такое бакпосев в гинекологии, достаточно прост. Что такое бакпосев? Любой бакпосев – это исследование, подразумевающее высадку биологического материала в определенную среду с целью выращивания имеющихся в нем патогенных микроорганизмов.

Что выявляет бак посев? В любых выделениях человеческого организма данный анализ может выявить не только бактерии и вирусы, но и их количество на том или ином участке. В гинекологии он также применяется для выявления различных патогенных организмов, которые не могут быть обнаружены в ходе других анализов.

Что может показать бакпосев

Вопрос о том, что может показать бак посев, встречается достаточно часто. Какие инфекции анализ на бакпосев у женщин может выявить? А что показывает бакпосев на микрофлору? Ответы на эти и другие вопросы мы приводим ниже.

В зависимости от выявляемого возбудителя различают:

  • Бакпосев на стафилококк. Бак посев на стафилококк показан при беременности и позволяет выявить золотистый, эпидермальный, сапрофитный и гемолитический стафилоккоки, опасные для беременной и плода.
  • Бакпосев на хламидии. Он показан при сомнительных, ложноположительных и ложноотрицательных результатах анализов на данное заболевание. Бак посев на хламидии дает достоверный результат и позволяет правильно назначить лечение.
  • Бак посев на . Он показан лицам с жалобами на основные проявления заболевания, в случае выявления у партнера означенной болезни, при вероятном риске бытового заражения. Остается информативным не только до или после лечения, но и во время проведения терапии.
  • Бак посев на туберкулез. Он показан при подозрении на туберкулез органов дыхания. Для получения достоверных результатов необходимо исследовать не менее трех проб мокроты.
  • Бакпосев на энтерококки (может встречаться в расшифровке в виде: «в бакпосеве enterococcus faecalis»). Позволяет выявить условно-патогенные энтерококки – представителей нормальной микрофлоры пищеварительного тракта человека, опасные и патогенные для состава микрофлоры мочеполовой системы.
  • Бак посев на коклюш. Позволяет выявить заболевание и разработать оптимальную программу лечения. Он показан при наличии слабого кашля, сохраняющегося на протяжении 1-2 недель, незначительного повышения температуры, выраженного недомогания.
  • Бак посев на дизентерийную группу. Анализ показан при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сопровождающихся поносами. А также при госпитализации в стационар, наличии уретрита, вульвовагинита, цервицита, цистита. Позволяет выявить сальмонеллез и дизентерию у детей и взрослых, эшерихиозы у детей.

Сколько делается анализ

В большинстве случаев ответы на вопрос о том, сколько делается бак посев, будут следующими:

  • 5-7 дней при исследовании слизи из носоглотки;
  • 4-7 дней при исследовании мочи и кала (в данном случае сроки бакпосева уточняются лаборантом) (Основная статья: « « );
  • 7 дней при исследовании соскоба урогенитального тракта;
  • 4-7 дней при исследовании на общую флору;
  • 10 дней при исследовании крови на стерильность.

Так или иначе, о том, сколько дней готовится бак посев из того или иного органа, необходимо узнавать в лаборатории, в которой вы его сдаете.

Результаты бак посева

Результаты бак посева выдаются на руки пациенту. Сама расшифровка бак посева производится микробиологом в лаборатории. Именно он выдает врачу заключение, содержащее данные по количеству тех или иных микроорганизмов, а также их чувствительности к антибиотикам.

Расшифровка бакпосева помогает врачу в случае превышения норм присутствия грибков или бактерий, а также наличия признаков воспаления, назначить соответствующее данному случаю лечение.

Как сдавать бак посев

На самом деле вопрос о том, как сдавать бак посев, достаточно актуален. И это не удивительно. Качество результата напрямую зависит от правильности забора материала исследования. Так как правильно сдать бакпосев?

Как подготовиться к бакпосеву? При заборе материала следует придерживаться следующих правил:

  • посуда, использующаяся при заборе, должна быть стерильной;
  • забор должен быть осуществлен до начала лечения антибиотиками;
  • доставка материала в лабораторию должна быть оперативной, в противном случае микроорганизмы просто погибнут (кал, например, должен быть доставлен в теплом виде);
  • при заборе мочи должна быть использована средняя порция мочи, взятая после утренних гигиенических процедур (доставка мочи в лабораторию должна быть осуществлена в течение 2-х часов);
  • при заборе мазка из носа и зева нельзя чистить зубы, пить, есть и полоскать нос и рот дезинфицирующими растворами;
  • кал должен быть набран в стерильную посуду стерильно же лопаточкой (доставка в лабораторию должна быть осуществлена в течение 5-ти часов);
  • кровь может быть взята до начала приема антибиотиков;
  • мокрота собирается с утра натощак во время приступа кашля со слизью в стерильную посуду (перед забором следует почистить зубы; доставка материала в лабораторию должна быть осуществлена в течение часа);
  • выделения из половых органов у женщин производится не ранее, чем через 14 дней после менструации и не ранее, чем через месяц после отмены антибиотиков (мочится на протяжении 2-х часов перед забором материала нельзя), мужчинам нельзя мочиться на протяжении 4-6 часов перед взятием пробы;
  • также стоит отметить, что бак посев у детей нисколько не отличается от «взрослых» методов. Материал на бак посев у ребенка можно брать с любых слизистых оболочек, как и собирать любые биологические жидкости для него.

Бакпосев на микрофлору

Бакпосев на микрофлору – что это такое? На сегодняшний день этот метод используется везде, где причиной заболевания являются болезнетворные микробы – в хирургии, урологии, гинекологии, дерматологии, гастроэнтерологии, оториноларингологии и т.д.

В подавляющем большинстве случаев бакпосев на микрофлору позволяет назначить адекватное лечение болезней, вызванных неспецифическими микроорганизмами, ответственными за тот или иной инфекционно-воспалительный процесс.

В качестве материала для бак посева на флору берется любая биологическая жидкость организма, содержащая максимальное количество изучаемых микроорганизмов – секрет простаты, кал, моча, кровь, содержимое уретры, влагалищное отделяемое, мокрота, гной и т.д.

Расшифровка бакпосева на микрофлору производится лаборантами той лаборатории, в которой был сдан материал. Далее врач в подробностях расскажет пациенту, как быть и что предпринимать для последующего лечения обнаруженного заболевания.

При соответствии полученных результатов по тестированию выделенной культуры с вышеуказанными данными полученный бактериальный штамм определяют как бактериальную культуру вида Yersinia enterocolitica.

В случае, если изучаемая бактериальная культура не типируется как бактерии вида Yersinia enterocolitica, возможен вариант повторного использования бактериальной суспензии со средой накопления, хранящейся в холодильнике при +4°С.

Оптимальным решением является постановка на исследование не одной пробы исследуемого образца, а целой серии проб.

Общие сроки бактериологического исследования материала - в пределах 7 суток.

Идентификация вида осуществляется биохимическими и серологическими методами.

Для проведения ускоренной диагностики заболевания можно использовать чумной бактериофаг. Бактериофаг Y. pestis выделяют из различных источников, включая ткани больного человека и животных, а также блох. Многие авторы связывают естественное быстрое угасание заболевания в очаге с наличием бактериофага. Его высокая специфичность и вирулентность для чумной палочки позволяют применять его для идентификации чумы внесением в исследуемый материал перед посевом либо по увеличению титра бактериофага в среде.

Для быстрого обнаружения также применяют AT, меченные флюоресцинами (позволяют обнаружить Y. pestis в различных объектах в течение первых 2 ч исследования), реакцию нейтрализации AT, реакцию преципитации в стандартных агаровых пластинках и метод ускоренного роста Y. pestis на средах обогащения.

Также разработаны методы, ускоряющие биологическую пробу, например, введение зараженным животным глюкокортикоидов или куриного желтка, что позволяет уско­рить диагностику чумы в случаях снижения вирулентности или при применении малой заражающей дозы.

Основные биохимические свойства, дифференцирующие Y.pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, представлены в таблицах 15 и 16. Дополнительными признаками могут служить результаты реакции Фoгеса-Проскауэра: всегда отрицательные у Y. pseudotuberculosis и положительные при 22-28°С у Y. enterocolitica. В последнее вре­мя для выделения Y.enterocolitica из фекалий предложена селективная среда, содержа­щая цефсулодин, иргазан и новобиоцин (CIN-агар).

Питательные среды для культивирования иерсиний Фосфатно-буферный раствор (фбр)

Раствор А: KH 2 PO 4 – 9,08 г в 1,0 л дистиллированной воды; раствор Б: Na 2 HPO 4  2H 2 O – 11,87 г в 1 л дистиллированной воды (pH 7,6-7,8). 150 мл раствора А соединить с 850 мл раствора Б. Разлить по 5 мл в пробирки, стерилизовать при 1 атм. в течение 1 часа.

Буферно-казеиново-дрожжевая среда (бкд)

Гидролизат казеина средней степени расщепления – 2,0 мл (Дагестанский НИИ питательных сред); экстракт пекарских дрожжей – 5,0 мл; фосфатно-буферный раствор (pH 7,6-7,8) – до общего объема 1 л. Экстракт пекарских дрожжей: к 500 г дрожжей, предварительно размельченных до гомогенной массы в фарфоровой ступке в малом объеме дистиллированной воды добавить до 1 л дистиллята. Взвесь слить в колбу и кипятить в течение 60 минут на медленном огне при помешивании. Взвесь охладить при 5°С в течение 16-18 часов. Затем надосадочную жидкость слить и профильтровать через широкопористый бумажный фильтр. Приготовленный дрожжевой экстракт разлить во флаконы, простерилизовать под давлением 0,5 атм. 30 минут; хранить при температуре 5-8°С в течение 12 месяцев.

К 0,5 л фосфатно-буферного раствора добавить 2,0 г гидролизата казеина (предворительно подготовленного согласно указаниям на этикетке) и 5,0 мл экстракта дрожжей. Смешать встряхиванием, добавить фосфатно-буферный раствор до общего объема 1 л и проверить pH готовой среды (должен быть 7,6-7,8). Далее смесь разлить в пробирки по 5,0 мл и автоклавировать под давлением 0,5 атм. в течение 20 минут. Среду можно использовать в течение 7-10 суток при хранении в условиях холодильника.

Одновременно учитываются патогенез заболевания и места наибольшего скопления предполагаемых микроорганизмов, а также пути их выведения из организма. К примеру, при сепсисе или заболевании, на фоне которого развивается бактериемия, наиболее информативным материалом для исследования выступает кровь. Если имеются серьезные подозрения на дизентерию, у пациента берут на анализ фекалии.
При пневмонии проводится анализ мокроты, а при подозрении на анаэробную инфекцию материал для исследования отбирают из глубоких слоев пораженных тканей.
У всех пациентов материал для бактериологического исследования целесообразно брать до начала терапии антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами. Забранный для бактериологического исследования биологический материал собирают в стерильную емкость, соблюдая правила асептики, не используя дезинфицирующих растворов. В максимально сжатые сроки емкость доставляют в специальную лабораторию. Транспортировку материала, предположительно содержащего возбудителей опасных инфекций, осуществляют в закрытой посуде, которую упаковывают в специальные биксы. К подобному материалу обязательно прилагают сопроводительный документ, содержащий следующие сведения: наименование собранного материала и дату его забора, ФИО, возраст и адрес пациента, максимально точную дату начала его заболевания и предварительный клинический диагноз. Доставленный материал необходимо исследовать максимально быстро.
Начинается анализ с бактериоскопии посредством исследования под микроскопом специальным образом окрашенных мазков из взятого от больного материала. В ряде случаев уже это позволяет установить возбудителя заболевания. Чаще же бактериоскопию используют в качестве ориентировочного (предварительного) метода исследования. На основе получения такого быстрого результата можно сразу начать антибактериальную терапию.


Для профилактики распространения инфекционных заболеваний обследуют не только больного, но и контактных с ним лиц: родственников, медперсонал и др.

Бактериологическое исследование подразумевает получение чистой культуры возбудителя и установление его принадлежности к виду, роду и т. д. Данный метод включает в себя определенные этапы. Вначале выделяется чистая культура возбудителя с помощью посева на плотные питательные среды. Выбор питательной среды зависит от свойств предполагаемого возбудителя. На следующем этапе осуществляют исследование полученных колоний бактерий макроскопическим и микроскопическим методами. Затем из небольших фрагментов каждой из образовавшихся колоний готовят мазки, которые окрашивают по Грамму. Далее исследуют их под микроскопом, определяя свойства, присущие выделенной культуре, и проверяют ее чистоту.
Оставшуюся часть колонии переносят в специальные пробирки со скошенным агаром (плотной питательной средой) для накопления чистой культуры с целью последующего полного изучения данной колонии. Все пробирки с агаром ставят на 18-24 ч в термостат. На 2-м этапе бактериологического исследования зачастую учитывают количество образовавшихся колоний микроорганизмов. Это имеет огромное значение при наличии у пациента заболеваний, вызываемых условно-патогенной микрофлорой. На З-м этапе бактериологического исследования проводятся идентификация выделенной чистой культуры возбудителя и установление степени его чувствительности к антибиотикам и прочим химиотерапевтическим лекарственным препаратам. Идентификацию культуры осуществляют по морфологическим, биохимическим, тинкториальным, антигенным, культуральным и токсикогенным свойствам:
Поскольку в последнее время растет число лекарственно-устойчивых форм бактерий, для назначения конкретному больному рациональной химиотерапии непременно требуется определение антибиотикограммы. Она отражает чувствительность или устойчивость выделенной чистой культуры возбудителя определенного заболевания к химиотерапевтическим препаратам и антибиотикам. Для чего используют либо метод бумажных дисков, либо значительно более точный, но и более трудоемкий метод серийных разведений. В основе 1-го метода лежит выявление области подавления роста колоний микрофлоры вокруг дисков, пропитанных различными антибиотиками.
При использовании методики серийных разведений определенный антибиотик разводят в пробирках, наполненных жидкой питательной средой, и помещают в них равное количество микроорганизмов. Учет результатов данного вида исследования проводят по отсутствию или наличию роста бактериальной микрофлоры в этих пробирках. Полученная в результате антибиотикограмма нередко оказывает помощь и врачам-эпидемиологам для установления идентичности штаммов микроорганизмов.

{module директ4}

При определении у пациента возможного бактерионосительства исследования осуществляют неоднократно, поскольку в единичной порции собранного биологического материала можно и не обнаружить возбудителя.

Доставка материала от больного для бактериологических исследований проводится с соблюдением определенных правил.

  • Забор биоматериала проводится в одноразовый контейнер со средой Эймса. Данный контейнер получают в регистратуре соответствующего лечебного учреждения.
  • Срок доставки материала от больного в лабораторию при температуре окружающей среды 10-20 °С должен составлять не более 6 ч, при более низкой температуре, например 2-8 °С, - до 48 ч.
  • Заморозка собранного биоматериала исключается.

Для того чтобы провести бактериологическое исследование мочи, пациенту следует собрать ее среднюю порцию объемом 3-5 мл. Сбор материала производится в стерильный пластиковый одноразовый контейнер после тщательного туалета гениталий, без использования антисептиков. Микробы, содержащиеся в моче, активно размножаются при комнатной температуре. Данный факт нередко дает ложные результаты при определении степени их содержания в моче (бактериурии).
Анализ спермы для бактериологического исследования собирается пациентом в стерильную пластиковую одноразовую емкость. Срок доставки материала в бактериологическую лабораторию при комнатной температуре окружающей среды составляет 1-2 ч.
Мокроту целесообразно собирать в утренние часы, до приема пищи (натощак), но после проведения санации ротовой полости. Сбор материала для исследования проводится в стерильную пластиковую емкость.
Забор секрета простаты для бактериологического исследования проводится квалифицированным врачом-урологом после предварительного проведения массажа предстательной железы. Перед забором данного материала пациенту рекомендуется полное половое воздержание на протяжении как минимум 2 дней.


Если сбор материала от больного для исследования производится в стерильную пробирку с ватным тампоном, то перед тем как его вставить, необходимо обжечь края пробирки на спиртовке.

Забор проб грудного молока для последующего бактериологического исследования осуществляется только до акта кормления ребенка или спустя 2 ч после него. В качестве подготовки к проведению забора данного материала пациентка обмывает 2 грудные железы теплой водой с мылом и насухо вытирает их чистым полотенцем. Поверхность сосков и кончики пальцев обрабатываются ватным шариком, слегка смоченным 70%-ным этиловым спиртом. Первая порция молока объемом примерно 0,5 мл сливается. После чего, не касаясь соска руками, пациентка сцеживает по 0,5-1 мл молока из правой и левой молочных желез в отдельные стерильные емкости. Нельзя допускать длительного хранения или транспортировки грудного молока при комнатной температуре окружающей среды. В противном случае может произойти размножение микрофлоры молока, следствием чего станут значительные количественные погрешности в результатах бактериологического анализа.

Важно помнить, что при регистрации бактериологического анализа грудного молока необходимо указать следующее:

  • в какой емкости содержится материал из правой, а в какой - из левой грудных желез;
  • из какой именно железы последний раз кормили ребенка.

Забор синовиальной жидкости производится квалифицированным врачом в специально подготовленную для этого стерильную пластиковую емкость. Важно помнить, что в лабораторных условиях данная процедура не проводится.
Забор отделяемого из раны в специальную одноразовую емкость, содержащую среду Эймса, осуществляется только врачом.
Желчь для проведения бактериологического исследования забирается в процессе дуоденального зондирования. Ее сбор осуществляется в 3 стерильные пробирки. В ряде случаев забор желчи производится в ходе оперативного вмешательства посредством стерильного шприца в 1 пробирку. Данная процедура никогда не осуществляется в лабораторных условиях.
Забор материала из зева и носоглотки (мазки) производится до приема пищи. Причем пациенту следует исключить чистку зубов и полоскание ротовой полости.
Кал на баканализ собирают с помощью стерильной проволочной петли, обмотанной ватой, которую вводят в прямую кишку на глубину 8-10 см. Затем петлю сразу погружают в стерильную пробирку с питательной средой и отправляют в бактериологическую лабораторию.

Исследование бактерий имеет большое практическое значение для человека. На сегодняшний день открыто большое количество прокариот, которые отличаются друг от друга по патогенности, области распространения, форме, размерам, количеству жгутиков и другим параметрам. Чтобы детально изучить данный штамм, применяется бактериологический метод исследования.

Какие существуют методы клеток?

Чтобы определить, являются ли бактерии патогенными, проводят исследование культуры различными способами. Среди них:

1. Бактериоскопический метод.

2. Бактериологический метод.

3. Биологический метод.

Бактериоскопический и бактериологический основаны непосредственно на работе с клетками прокариот, когда биологический анализ требуется для изучения влияния таких клеток на живой организм подопытных животных. По степени проявления тех или иных признаков заболевания ученый может сделать вывод о наличии или отсутствии патогенных бактерий в пробе, а также естественно их размножить в организме животного для получения их культуры и использования в других работах.

Бактериологический метод исследования отличается от бактериоскопического. В первом для анализа используется специально подготовленная культура живых прокариот, когда во втором проводится работа с мертвыми или живыми клетками на предметном стекле.

Этапы бактериологического метода исследования. Микробиология

Принцип изучения свойств бактериальной культуры может пригодиться как для ученых-микробиологов, которые поставили цель исследовать прокариотические клетки, так и для лаборантов, задача которых заключается в установлении патогенности или непатогенности бактерий, а затем диагноза пациента.

Методика изучения бактерий делится на три этапа:

1. Выделение бактерий из первоначальной пробы.

2. Высевание бактерий и выращивание изучение ее свойств.

3. Детальное исследование бактериальных клеток.

Первый этап

Проба, или мазок, берется со свободной поверхности среды или у пациента. Таким образом мы получаем «коктейль» из множества видов бактерий, которые должны высеять на питательную среду. Иногда появляется возможность выделить сразу необходимые бактерии, зная их очаги распространения в организме.

Через двое-трое суток отбираются нужные колонии и высеваются на твердые среды чашек Петри с помочью стерильной петли. Во множестве лабораторий работают с пробирками, где может находиться твердая или жидкая питательная среда. Так и проводится бактериологический метод исследования в микробиологии.

Второй этап

После получения отдельных колоний бактерий проводится непосредственный макро- и микроанализ. Измеряются все параметры колоний, определяется цвет и форма каждой из них. Нередко проводится подсчет колоний на чашке Петри, а затем в исходном материале. Это имеет значение при анализе патогенных бактерий, от числа которых зависит степень заболевания.

Бактериологический метод исследования, 2 этап которого заключается в изучении отдельных колоний микроорганизмов, может быть сопряжен с биологическим способом анализа бактерий. Еще одна цель работы на этом этапе - увеличить количество исходного материала. Это можно сделать на питательной среде, а можно провести эксперимент в естественных условиях на живых подопытных организмах. Патогенные бактерии будут размножаться, и в результате кровь будет содержать миллионы клеток прокариот. Из взятой крови легко приготовить необходимый рабочий материал бактерий.

Третий этап

Самая важная часть исследования - это определение морфологических, биохимических, токсигенных и антигенных свойств культуры бактерий. Работа ведется с заранее «очищенными» культурами на питательной среде, а также с препаратами (зачастую окрашенными) под микроскопом.

Установить принадлежность патогенных или условно-патогенных бактерий к той или иной систематической группе, а также определить их устойчивость к лекарствам позволяет бактериологический метод исследования. 3 этап - антибиотики, т. е. анализ поведения клеток бактерий в условиях содержания лекарственных препаратов в окружающей среде.

Исследование устойчивости культуры к антибиотику имеет важное практическое значение, когда необходимо прописать для конкретного пациента необходимые, а главное, действенные препараты. Здесь и может помочь бактериологический метод исследования.

Что такое питательная среда?

Для развития и размножения бактерии должны находиться в заранее подготовленных По консистенции они могут быть жидкие или твердые, а по происхождению - растительные или животные.

Основные требования к питательным средам:

1. Стерильность.

2. Максимальная прозрачность.

3. Оптимальные показатели кислотности, активности воды и других биологических величин.

Получение изолированных колоний

1. Метод Дригальского. Он заключается в том, что на бактериальную петлю наносится мазок с различными видами микроорганизмов. Этой петлей проводят по первой чашке Петри с питательной средой. Далее, не меняя петлю, методом остаточного материала проводят по второй и третьей чашкам Петри. Так, на последних образцах колонии бактерии будут засеваться не слишком плотно, тем самым упрощается возможность найти необходимые для работы бактерии.

2. Метод Коха. В нем используются пробирки с расплавленной питательной средой. Туда помещается петля или пипетка с мазком бактерий, после чего содержимое пробирки выливается на специальную пластинку. Агар (или желатин) застывает через какое-то время, а в его толще легко обнаружить нужные колонии клеток. Важно перед началом работы развести смесь бактерий в пробирках, чтобы концентрация микроорганизмов не была очень большой.

Этапы которого основаны на выделении нужной культуры бактерий, не обходится без этих двух способов нахождения изолированных колоний.

Антибиотикограмма

Визуально реакцию бактерий на препараты можно заметить двумя практическими способами:

1. Метод бумажных дисков.

2. Разведение бактерий и антибиотика в жидкостной среде.

Метод бумажных дисков требует наличия культуры микроорганизмов, которые были выращены на твердой питательной среде. На такую среду кладут несколько бумажек округлой формы, пропитанных антибиотиками. Если препарат успешно справляется с нейтрализацией бактериальных клеток, после такой обработки останется участок, лишенный колоний. Если же реакция на антибиотик отрицательная, бактерии выживут.

В случае использования жидкой питательной среды сперва готовят несколько пробирок с культурой бактерий разных степеней разведения. В эти пробирки добавляют антибиотики, и в течение суток наблюдают за процессом взаимодействия вещества и микроорганизмов. В конечном итоге получается качественная антибиотикограмма, по которой можно судить об эффективности препарата для данной культуры.

Основные задачи анализа

Здесь перечислены по пунктам цели и этапы бактериологического метода исследования.

1. Получить исходный материал, который будет использоваться для выделения колоний бактерий. Это может быть мазок с поверхности любого предмета, слизистой оболочки или полости органа человека, анализ крови.

2. на твердой питательной среде. Через 24-48 часов на чашке Петри можно обнаружить колонии бактерий разных видов. Отбираем по морфологическим и/или биохимическим критериям нужную и проводим уже с ней дальнейшую работу.

3. Размножение полученной культуры. Бактериологический метод исследования может опираться на механический или биологический способ увеличения численности культуры бактерии. В первом случае ведется работа с твердыми или жидкими питательными средами, на которых в термостате размножаются бактерии и образуют новые колонии. Биологический способ требует естественных условий увеличения численности бактерий, поэтому здесь микроорганизмами заражается подопытное животное. Через несколько суток в пробе крови или мазке можно обнаружить множество прокариот.

4. Работа с очищенной культурой. Чтобы определить систематическое положение бактерий, а также их принадлежность к возбудителям заболеваний, необходимо провести тщательный анализ клеток по морфологическим и биохимическим признакам. При исследовании патогенных групп микроорганизмов важно знать, насколько эффективно действие антибиотиков.

Это была общая характеристика бактериологического метода исследования.

Особенности проведения анализа

Главное правило проведения бактериологического исследования - это максимальная стерильность. Если идет работа с пробирками, посевы и пересевы бактерий должны проводиться только над нагретой спиртовкой.

Все этапы бактериологического метода исследования требуют использования специальной петли или пастеровской пипетки. Оба инструмента должны быть предварительно обработаны в пламени спиртовки. Что касается пастеровской пипетки, то тут перед термической стерилизацией необходимо отломать кончик пипетки пинцетом.

Техника посева бактерий тоже имеет свои особенности. Во-первых, при посеве на твердые среды проводят бактериальной петлей по поверхности агара. Петля, конечно же, уже должна иметь на поверхности образец микроорганизмов. Также практикуется посев внутрь питательной среды, и в этом случае петля или пипетка должны достичь дна чашки Петри.

При работе с жидкими средами используются пробирки. Здесь важно следить, чтобы жидкости не касались краев лабораторной посуды или пробки, а используемые инструменты (пипетка, петля) не дотрагивались до посторонних предметов и поверхностей.

Значение биологического метода исследования

Анализ пробы бактерий имеет свое практическое применение. Прежде всего бактериологический метод исследования может использоваться в медицине. К примеру, необходимо изучить микрофлору больного, чтобы установить правильный диагноз, а также выработать правильный ход лечения. Здесь помогает антибиотикограмма, которая покажет активность лекарственных препаратов против возбудителя заболеваний.

Анализ бактерий используется в лаборатории для определения таких опасных заболеваний, как туберкулез, возвратный тиф или гонорея. Также он применяется для изучения бактериального состава миндалин, полостей органов.

Бактериологический метод исследования можно использовать для определения загрязненности среды. По данным о количественном и качественном составе мазка с поверхности какого-либо предмета определяется степень заселенности данной среды микроорганизмами.

Бактериологический посев - один из видов лабораторного исследования, основанный на анализе биологического материала посредством его высева на специальные питательные среды. По результатам бакпосева выявляется наличие/отсутствие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов определенного типа с целью дальнейшего изучения их физико-химических свойств и определения схемы лечения диагностированных инфекционных заболеваний.

Ценность данного способа исследований заключается в том, что он позволяет не только обнаружить болезнетворные бактерии, но и установить степень их чувствительности к препаратам антибактериального действия. Иными словами, на основании анализа можно безошибочно подобрать комплекс медикаментозных средств для проведения успешной терапии.

Основными плюсами бактериологического посева можно назвать следующие:

  • Высокая точность исследований. В отличие от ИФА (иммуноферментный анализ), ПЦР (полимеразная цепная реакция), вероятность получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов практически равна нулю.
  • В качестве биологического материала возможно использование абсолютно любой жидкости, выделяемой из организма человека.
  • Разработка атибиотикограммы. То есть, установление степени воздействия на выявленные микробы того или иного антибиотика, что позволяет проводить лечебные назначения с максимально высокой точностью.

Недостатки метода

К минусам бакпосева можно отнести такие факторы:

  • Сложность выполнения процедуры и необходимость соблюдения специфических требований к забору материала.
  • Длительность ожидания результат исследований.
  • Наличие специальной лаборатории, а также соответствующей квалификации медперсонала, задействованного в проведении анализа.

Цель проведения бактериологического посева

Метод бакпосева достаточно распространен в медицинской практике, применяясь для диагностики заболеваний в самых разных областях медицины: хирургии, онкологии, гастроэнтерологии, отоларингологии и т. д. В гинекологии и урологии данный вид лабораторного анализа используется для исследования микрофлоры в целях диагностики следующих возбудителей:

  • микоплазмоза и уреаплазмоза;
  • трихомониаза;
  • кандидоза (молочницы);
  • хламидиоза.

По итогам исследования можно не только выявить наличие патогенных бактерий, но и определить их количественных состав. Что, в свою очередь, дает понимание того, на какой стадии прогрессирует болезнь, и скоординировать дальнейшее лечение.

Помимо мазка из половых органов для бакпосева используется также и ряд других разновидностей биологического материала. Например:

  • Кровь - для проверки на стерильность, при внутрисосудистых инфекциях, эндокардите.
  • Слизистая из носа, горла - для выявления вирусов и бактерий, провоцирующих риниты, синуситы, ангины и другие ЛОР-заболевания.
  • Кал - для диагностирования дисбактериоза и прочих нарушений желудочно-кишечного тракта.
  • Желчь - при наличии воспалительных заболеваний печени, поджелудочной железы, желчного пузыря.
  • Мокроты - для определения инфекций дыхательных путей, в частности, туберкулеза легких.
  • Слизистая глаз - при развитии гнойных воспалений глаз и других офтальмологических патологий.
  • Кожный жир - для выявления стафилококков, грибков и прочих представителей патогенной флоры, скапливающихся в эпителиальном слое кожи лица.

Механизм проведения

Процедуру лабораторного исследования условно можно разделить на несколько этапов:

  • Забор материала и помещение его на специальные питательные среды. Тип используемой среды зависит от цели проведения бакпосева (выращивание одного определенного возбудителя или расшифровка бактериальных культур с целью дальнейшего построения антибиотикограммы). При необходимости жидкие среды могут заменяться впоследствии на твердые поверхности, что позволяет проводить более точную идентификацию колоний бактерий.
  • Помещение питательной среды в специальное оборудование (термостат), где создаются соответствующие условия для роста и размножения патогенных возбудителей. Имеют значение показатели влажности воздуха, температуры, освещения и т. д.
  • Подкрашивание материала различными реагентами для лучшего осмотра и дальнейшего анализа. За счет красителей бактерии меняют свою расцветку и становятся более заметными на общем фоне питательной среды.
  • Оценка выросших колоний по определенным показателям: плотность, форма, расцветка, химический состав и т. д.

Важно! Одним из важнейших условий проведения бактериологического посева является соблюдение абсолютной стерильности помещения лаборатории, а также используемой посуды и инструментов. Для переноса материала на среду применяются такие приспособления как стеклянная палочка, бактериальная петля, пастеровская пипетка.

В данном видео, на примере бактериологического анализа мочи, рассказывается о принципе проведения бакпосева.

Расшифровка бакпосева

Результат анализа оценивается по нескольким показателям, учитывающим не только качественный фактор (подтверждение наличия бактерий-возбудителей в среде), но и количественный - то есть, степень концентрации патогенных микроорганизмов в исследуемом материале. Для подсчета количества микробных клеток используется понятие колониеобразующей единицы (КОЕ), по которому можно определить уровень насыщенности бактериями изучаемого образца.

Выделяют 4 степени роста возбудителей:

  • Первая - скудный рост бактерий на жидкой питательной среде и отсутствие роста на твердой среде. Такой результат не считается отклонением от нормы.
  • Вторая - рост бактерий на твердой среде до 10 колоний. Свидетельствует не о наличии болезни, а скорее о загрязненности лабораторных принадлежностей для исследования.
  • Третья - рост бактерий на твердой среде в пределах 10-100 колоний.
  • Четвертая - более 100 колоний.

В заключении, выдаваемом на руки пациенту, результаты бакпосева обозначаются следующим образом:

  • указывается название выявленного возбудителя на латинском языке (например, Trichomonas vaginalis - трихомонада);
  • прописывается концентрация микроорганизма, выращенного в условиях питательной среды (норма - до 10 3 КОЕ/мл, ненорма - от 10 5 КОЕ/мл);
  • указывается характер среды: флора условно-патогенна, патогенная.

Одновременно с определением концентрации бактерий производится анализ их чувствительности к антибиотикам. Наличие положительной реакции на тот или иной антибактериальный препарат обозначается символом «S», отрицательной - «R».

Правила проведения бакпосева на микрофлору у женщин

Перед сдачей анализа необходимо учесть ряд обязательных требований в части соблюдения правил личной гигиены, а также непосредственно механизма забора биологического материала. Заключаются они в следующем:

  • за сутки до процедуры избегать половых контактов любого вида (анальный, оральный, вагинальный);
  • не проводить спринцевания, ванночки, примочки на половые органы и прочие антисептические процедуры;
  • отказаться от применения вагинальных свечей, таблеток;
  • мазок должен браться не ранее, чем через 2 недели после менструации;
  • за месяц до анализа исключить прием антибиотиков;
  • не мочиться перед забором материала на протяжении 2-х часов.

Для исследования могут использоваться заборы из влагалища, мочеиспускательного канала, шейки матки, цервикального канала. Перед началом процедуры делается тщательная обработка половых органов, при необходимости вход в вагину закрывается ватным тампоном. При анализе мочи берется ее средняя порция, помещаемая затем в стерильную баночку. Моча должна быть обработана в течение 2-х часов после забора и храниться при температуре не выше 20°С.

Правила проведения бакпосева на микрофлору у мужчин

В качестве материала для исследования может использоваться эякулят (сперма), кровь, моча, секрет простаты. Для получения максимально точного результата мужчинам следует придерживаться таких требований перед сдачей анализа:

  • воздержаться от сексуальных контактов за 1-2 перед тестированием на бакпосев;
  • исключить прием антибиотиков за 3-4 недели до сдачи анализа;
  • не мочиться за 4-5 часов до взятия пробы;
  • тщательно вымыть половые органы и сменить нижнее белье.

О любых изменениях в самочувствии следует незамедлительно сообщать врачу во избежание получения некорректных результатов анализа.

Бакпосев при беременности

Любая бактериальная инфекция, «дремлющая» в организме женщины, может отрицательно повлиять на течение беременности, привести к заражению плода, а в некоторых случаях даже спровоцировать выкидыш на ранних сроках. Чтобы обезопасить себя и будущего ребенка от различных патологий, необходимо осознанно подходить к планированию зачатия и при необходимости проводить соответствующую антибактериальную терапию.

Среди показаний для проведения бакпосева выделяют следующие:

  • наличие воспалительных заболеваний половых органов и мочеполовой системы;
  • выявление причин невынашиввания при предварительном диагнозе - бесплодие;
  • диагностика воспаления предстательной железы (у мужчин);
  • подготовительные действия к зачатию ребенка;
  • выбор правильной схемы лечения при наличии мочеполовых инфекций;
  • частая смена половых партнеров и пренебрежение механической контрацепцией (презерватив);
  • внематочная беременность (наступившая или присутствовавшая в прошлом).

Серьезную опасность для здоровья женщины, особенно в период беременности, представляет заболевание уреаплазмозом. Поскольку чаще всего оно протекает бессимптомно, вызывая впоследствии ряд серьезных осложнений (эндометрит, воспаление матки и т. д.), то своевременное диагностирование инфекции помогает провести необходимую терапию и снизить риск инфицирования ребенка в процессе вынашивания и родов.

Сроки готовности

Сроки готовности анализа зависят от вида исследуемого материала и могут варьироваться от 3 до 14 дней. При взятии мазка из урогенитального тракта продолжительность теста занимает в среднем 7 дней. Посевы на микрофлору (у мужчин и женщин) длятся 5-8 дней. Предварительный результат можно получить не ранее 3-х дней поле сдачи мазка.

При относительной длительности и специфики проведения бактериологического посева на сегодняшний день данный вид лабораторного исследования является одним из самых точных и эффективных способов диагностики, позволяющий не только определить тип болезнетворных организмов, но и спланировать схему борьбы с выявленным заболеванием.